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Dou MaxVisionTM 金沙国际唯一官网网址双重染色步骤

发布时间:2013-3-18 10:39:08

Dou MaxVisionTM金沙国际唯一官网网址双重染色试剂盒是根据聚合物技术分别把碱性磷酸酶、辣根过氧化物酶与抗鼠或抗兔IgG分子结合在多聚物上形成多聚物分子,利用不同酶催化不同底物产生不同颜色的沉淀物来特异地反应组织和细胞中不同抗原的存在状态。其染色步骤如下:?
1、石蜡切片脱蜡、水化,自来水冲洗;?
2、根据第一抗体的要求,对组织进行相应的抗原修复;?
3、除去PBS,切片上滴加过氧化物酶阻断试剂,室温下孵育10分钟。PBS冲洗3×3分钟;?
4、除去PBS,切片上滴加正常非免疫动物血清,室温下孵育10分钟;?
5、除去血清,切片上滴加第一抗体(鼠抗),室温下孵育60分钟。PBS冲洗3×3分钟;?
6、除去PBS,切片上滴加MaxVisionTM/AP试剂,室温下孵育15分钟。PBS冲洗3×3分钟;?
7、除去PBS,切片上滴加BCIP/NBT显色试剂显色,蒸馏水冲洗终止显色。PBS冲洗3×3分钟;?
8、除去PBS,切片上滴加双染增强试剂,室温下孵育10分钟。PBS冲洗3×3分钟;?
9、除去PBS,切片上滴加另一个第一抗体(兔抗),室温下孵育60分钟,PBS冲洗3×3分钟;?
10、除去PBS,切片上滴加MaxVisionTM/HRP试剂,室温下孵育15分钟,PBS冲洗3×3分钟;?
11、除去PBS,切片上滴加AEC显色试剂显色;?
12、自来水冲洗终止显色,苏木素复染,PBS返蓝,水性封固剂封固。
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